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高效液相色谱仪直接分析氨基酸物质

来源:绿洲生化  发布时间:2013-4-23 11:25:00  点击:1714

高效液相色谱仪直接分析氨基酸物质:

 
样品:12种未衍生氨基酸混合物溶液(1mMol/L)
 
色谱仪:“上海吉理LC600”液相色谱仪,四元梯度泵
 
配有二极管阵列检测器、蒸发光散射检测器和化学工作站
 
检测器:500型ELSD蒸发光散射检测器
 
漂移管温度为95℃,氮气流速2.5L/min
 
色谱柱:AlltimaC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
 
流动相:A为含0.1%TFA的水
 
B为含0.1%TFA的乙腈
 
梯度:时间0min5min20min
 
A液100%100%60%
 
B液0%0%40%
 
流速:0.6mL/min
 
进样:20μL
 
结果:所有组分在25min之内全部流出,各组分完全分离,组分流出顺序为:峰1为丝氨酸,峰2为赖氨酸,峰3为谷氨酸,峰4为精氨酸,峰5为脯氨酸,峰6为缬氨酸,峰7为甲硫氨酸,峰8为酪氨酸,峰9为异亮氨酸,峰10为亮氨酸,峰11为苯丙氨酸,峰12为组氨酸。
 
一、LC—P600型高压恒流泵
 
柱塞杆采用浮动导向结构,驱动凸轮由高强度合金钢制造。采用微处理器控制微步驱动电路,使得驱动泵的步进电机运行平稳、噪声低、速度调节范围大。LC-P600高压恒流泵在压力为0~42Mpa的范围内,流量可以从0.001mL/min开始到9.999mL/min。这样满足了常规分析到微流量分析的需要。
 
在单泵等度分析时,可根据该仪器上全汉字显示液晶屏的提示语句,通过四个功能键就可变换各种操作模式,并且可以方便地设置流量、压力上下限、持续工作时间、压力单位等参数。
 
LC-P600高压恒流泵具有过程监测功能。微处理器实时控制泵的流量和检测输液压力。在压力超限的情况下,报警并自动停止泵的运行。
 
可采用LC-WS100工作站,通过RS232接口,控制多达四台泵的运行,建立多元梯度分析系统。
 
LC-P600高压恒流泵整体结构采用模块化设计,包括机械部分和电路部分都可以独立装拆,因此故障检查和调换都非常方便。
 
LC-P600高压恒流泵采用双柱塞并联泵结构,双泵头交替输液。在同样输液量的情况下,它的输出脉动要比串联泵低得多,而活塞杆和密封圈寿命要比常规串联泵长一倍。
 
二、LC—UV600型紫外检测器
 
LC-UV600紫外检测器采用了平行的双锥孔流通池,样品池和参照池完全处于对等的条件。锥孔设计的流通池,可以在同样的池体积情况下,提高通过池孔的光能量,明显降低了仪器的静态噪音和信号漂移。
 
光路系统采用了精密定位结构,所以精度高、偏移小。氘灯座和光路系统采用热隔离安装技术,降低了仪器的稳定时间,并且使氘灯的发热对光路系统的影响降到最低。
 
控制电路采用多微处理器结构,分别管理信号采集、数据处理、系统控制和通信。LC-UV600紫外检测器在做等度分析时,可以方便地通过全汉字的液晶屏与七个功能键,设置紫外光波长、滤波常数、输出量程、运行时间等参数。并且可以实现开关氘灯、光谱扫描、启动分析程序等功能。
 
该仪器的另一大特点是:LC-UV600紫外检测器独特地使用了数字信号直接输出的线路结构。相比以往的紫外检测器色谱信号大多数采用模拟信号输出或者是内部数字信号处理后,再转换成模拟信号输出到色谱数据处理装置,然后再经过模数转换。这样多重的转换势必导致信号畸变和干扰。而LC-UV600紫外检测器通过RS232接口将数字化信号毫无损失地送到LC-WS600工作站进行对数转换和积分处理。
 
LC-UV600紫外检测器可以通过LC-WS600工作站上的图形化界面,方便地实现控制氘灯开关、光谱扫描、继电器开关、波长扫描等功能。
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